Protocole d'extraction des glucides complexes du foie

Étapes réalisées au laboratoire

1. Peser 50 g de foie

2. Découper l’échantillon en petits morceaux et les placer dans le mixer

3. Ajouter 100 mL d’acide trichloroacétique à 4 %.

4. Broyer finement

5. Répartir le broyat dans des tubes de centrifugeuse bleus à l'aide d'un entonnoir.

6. Centrifuger à 5000 tours par minute pendant 5 minutes. On obtient environ 7 mL de surnageant par tube.

Étapes à réaliser vous-même

7. A l'aide d'un marqueur, repérer les 4 tubes à bouchon rouge

   • Foie + vos initiales

   • Eau distillée

   • Amidon

   • Glycogène

8. Transférer à l'aide d'une pipette, dans le tube à bouchon rouge identifié "Foie",  2 mL de surnageant, sans toucher au culot.

9. Ajouter 4 mL d’alcool à 95 % pour faire précipiter les glucides complexes.

10. Mélanger en retournant plusieurs fois le tube (ne pas secouer)

11. Centrifuger à 5 000 tours par minute pendant 5 minutes pour récupérer le précipité. 

12. Éliminer le surnageant en le versant dans l'évier sans perdre ni perturber le culot (contenant les glucides complexes recherchés) 

13. Dissoudre le culot dans 2 mL d'eau distillée.

14. Dans les 3 autres tubes à bouchon rouge, transférer 2 mL des solutions témoins (Eau distillée ou Amidon ou Glycogène).

15. Ajouter 5 gouttes de Lugol dans les 4 tubes

16. Refermer les tubes à l'aide des bouchons rouges et homogénéiser en les retournant plusieurs fois.